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其他/D-Luciferin potassilum D-荧光素钾盐

其他/D-Luciferin potassilum D-荧光素钾盐

简要描述:其他/D-Luciferin potassilum D-荧光素钾盐
D-荧光素(D-Luciferin)是荧光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍用于整个生物技术领域,特别是体内活体成像技术。其作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下,荧光素(底物)能够被氧化发光。当荧光素过量时,产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性(见下图)。

产品型号: 100mg

所属分类:其他

更新时间:2018-01-10

厂商性质:代理商

详情介绍

D-Luciferin, Potassium Salt D-荧光素钾盐产品描述

D-荧光素(D-Luciferin)是荧光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍用于整个生物技术领域,特别是体内活体成像技术。其作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下,荧光素(底物)能够被氧化发光。当荧光素过量时,产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性(见下图)。将携带荧光素酶编码基因(Luc)的质粒转染入细胞后,导入研究动物如大小鼠体内,之后注入荧光素,通过生物发光成像技术(BLI)来检测光强度变化,从而实时监测疾病发展状态或药物的治疗功效等。也可以利用ATP对此反应体系的影响,根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。

D-Luciferin, Potassium Salt D-荧光素钾盐
D-荧光素也常用于体外研究,包括荧光素酶和ATP水平分析;报告基因分析;高通量测序和各种污染检测。目前市场上有三种产品形式,D-荧光素(游离酸),D-荧光素钠盐,以及D-荧光素钾盐。这三种产品主要的差别在于溶解特性上。D-荧光素(游离酸)水溶性以及缓冲体系的溶解性都很弱,除非溶于弱碱如NaOH和KOH溶液。溶于甲醇(10 mg/ml)和DMSO(50 mg/ml)。但钠盐和钾盐形式的D-荧光素能够非常容易且快速的溶入水或者缓冲液中,使用方便,溶剂无毒性,特别适合体内实验。配成液体后的这三种产品,在绝大多数的应用上都没有实质性的差别。

 产品性质

中文别名(Chinese synonym)

D-荧光素钾盐;

英文别名(English synonym)

(S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid potassium salt; D-Luciferin firefly, potassium salt;

CAS号(CAS NO.)

115144-35-9

分子式(Formula)

C11H7N2O3S2 K

分子量(Molecular weight)

318.42 g/mol

外观(Appearance)

淡黄色粉末

溶解性(Solubility)

溶于水(60 mg/ml)

纯度(Purity)(HPLC)

>99%

运输和保存方法

  冰袋运输。-20℃干燥避光保存。

使用方法

1.体外生物发光检测

1)用蒸馏水溶解D-荧光素钾盐,配制成100 mM的储存液(200×,浓度30mg/ml)。混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存,避免反复冻融。

2)用预热好的组织培养基1:200稀释储存液,配制工作液(终浓度150µg/ml)。

3)去除培养细胞的培养基直至无残留。

4)待图像分析前,向细胞内添加1×荧光素工作液,然后进行图像分析(或者细胞放在37℃短时间孵育后检测可增强信号)。

2.    活体成像分析

1)用无菌的DPBS(w/o Mg2+)配制D-荧光素钾盐工作液(15mg/ml),0.2µm滤膜过滤除菌。混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存,避免反复冻融。一旦使用,放到4℃解冻,保持冰冷且避光。

 2) 注射量取决于注射方式,具体如下:

注射方式

剂量

静脉注射(25-27gauge针头)

按10µl/g体重浓度,加入相应体积的15mg/ml荧光素工作液

腹腔注射(25-27gauge针头)

按10µl /g体重浓度,加入相应体积的15mg/ml荧光素工作液

肌肉注射(27gauge针头)

50µl,浓度为1-2mg/ml荧光素工作液

鼻内注射(pipette)

50µl,浓度为3mg/ml荧光素工作液

3) 注射入体内10-20 min(待光信号达到zui强稳定平台期),再进行成像分析。

注:建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线,从而确定zui高信号检测时间和信号平台期。



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